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 來源: 日期:2025.02.25 

實驗(yàn)大小鼠食物和飲水的限製

背景

實驗大小鼠通常可以自(zì)由采食和飲水。然而,在(zài)行為學、代謝學或(huò)胃腸道研究中,適當的食(shí)物或水分(fèn)的限製往往是實驗實施(shī)所必需的。盡管如此,即(jí)使(shǐ)在實施此(cǐ)類限製措施時,也必須(xū)確保動物的健康狀況,避(bì)免其承(chéng)受不必要的痛苦(kǔ)與壓力。

不同物種對食物或水分限製下的生理反應存在差異,因此實驗設計需充分考慮這(zhè)些特性。齧(niè)齒動(dòng)物主要在暗(àn)周期內攝取大部分日常食(shí)物和水分,因(yīn)此“過夜”禁食(shí)通常等同於24小(xiǎo)時禁食。此外,相(xiàng)較於(yú)食物限製,大小鼠對12至24小時甚至更長時間的水分限(xiàn)製具有更高的耐受性。

與其他物種相比,小鼠和(hé)大鼠的胃腸道排空速度較快(kuài):小鼠的胃排空時間約為3.5小時,腸道排空時間約為6小時;而(ér)大鼠的胃排空時間約為2.5小時,腸道排空時間約為(wéi)4小時。因此,在進行(háng)胃腸道研究或需要在灌胃前清空胃部(bù)內容物的實驗設計中,應充分考慮這(zhè)些特性,以確(què)保實驗的準確與(yǔ)可重複性。

定義(yì)

食物限製:動物連續4小時或以上無法獲得食物。

飲水限製:動物連續4小時或以上無法獲得飲水。

政策

當大小鼠被從飼養架取(qǔ)出並運輸到動物設施的操(cāo)作室或外部實驗室時,尤其是如果它們從自動飲水係統中移除超過4小時(對於小鼠)或6小時(對於大鼠),則必(bì)須提供水(shuǐ)源(yuán)(水瓶或補水凝膠(jiāo))。

當使用短期食物限製以空腹進行灌胃時,應充分考慮胃排空時間,小鼠(shǔ)禁食超過4小時和大鼠禁食超過6小時(shí)的情況必須有充(chōng)分的科學依據,並獲得IACUC的批準。需要解釋所提方案對於該物種和實驗的適用性。如果食物(wù)或飲水的限製是為了(le)用於行為(wéi)學(xué)研究,在可以到達預期行為學結果基礎上,將限(xiàn)製程度降到最低。在提出食物或飲水限製方案之前(qián),應充(chōng)分考慮正向強化的方法,例如使用誘人的食物或飲水“獎勵”的激(jī)勵行為。在初期訓練階段之後,可能需要(yào)程度較輕的飲食或水限製,並相應地調整限製(zhì)程度。每當(dāng)動物通過食物或水“獎勵”獲得其飲食的(de)一部分(fèn)時,通過食物或飲水“獎勵”獲得的食物(wù)和水的總(zǒng)量加上自由(yóu)進(jìn)食獲得的食物和水的總量必(bì)須足以維持動物的健康狀態(tài),而(ér)不會導致動物顯著的體重下降(jiàng)。根據2013年NIH《行(háng)為研究飲食(shí)控製(zhì)指南》(Guidelines for Diet Control In Behavioral Research Studies),如(rú)果動物表現出脫水的症狀,包括(kuò)但不限於皮(pí)膚彈性下降或眼窩凹陷,則必須通(tōng)知獸醫服務(wù)部門(mén)。除非(fēi)另有IACUC批準(zhǔn),如果動物在限食或限水期間體重下降20%,必須立即增加攝取量,直到體重恢(huī)複,在動物使用方案中必須(xū)詳細說明這一計劃。在幼齡動物進行(háng)研究(jiū)時,應特別關注其正常生長(zhǎng)對飲食的需求。許多齧齒類實驗(yàn)動物的正常生長曲線已經(jīng)發表,在製定幼齡動物的食物或水限製(zhì)計劃時應參考這些生長曲(qǔ)線。

當不提供自由采食的食物或水時,則應允許動物(wù)在行為訓練期間獲得足夠的(de)食物和水,或者每天適當補充其攝入量。在行為訓練和/或補(bǔ)充期間,應同時提供食物和水,以(yǐ)盡量減少因脫水引起的厭食症。在需要補充的(de)情況(kuàng)下,每日提供的(de)食物和(hé)飲水的量應等同於動物在自由采食條件下通常消耗的量,或在實驗需要的(de)情況下輕度(dù)限製的量(如消耗量的80%),並得到IACUC的特別批準。必須獲得限製前的數據以確定適當的限製(zhì)量,或提供參考範圍給(gěi)IACUC。除非在IACUC方案中另(lìng)有(yǒu)說明,否則從(cóng)自由采食過渡到(dào)食物或飲水的限製應逐步進行,持續一(yī)到多天,以盡(jìn)量減少動物的壓力。當食物或(huò)飲水的獲取時間受到限製時,應在(zài)動物光/暗周期(qī)中的一致時(shí)間提供,以使行為適應研究(jiū)時間表。

當食物和水用作行為(wéi)激勵(lì)時必須在IACUC方案中說明其(qí)類型和濃度(如適用)。食物和飲水獎勵物品應盡量減少向SPF動物引入病原的風險,優先選擇經過輻照或高壓滅菌處理(lǐ),專用於齧(niè)齒類行為(wéi)獎勵的食物。如果使用未經輻照或高壓滅菌處理的食物,必須在在(zài)IACUC方案中提供充分的理由。如果動物(wù)的大部分日常食物攝入發生在行為測試期間(jiān),則應選(xuǎn)擇營養均衡的齧(niè)齒類動物食物。

每隻受到食物或飲水限製(zhì)的動物必須由訓練有素(sù)和有經驗的研究人員至少每天觀察和(hé)稱重一次。每日體重(chóng)和攝(shè)食記錄必(bì)須保持,並隨時提供給獸醫服務部門和IACUC審查。所有食物(wù)或飲水(shuǐ)的限製方案都應明確說明(míng)如何監測動物的健康狀況,並包括幹(gàn)預標準(zhǔn),如體重減輕、身體狀況下降和/或脫水的臨床症狀(zhuàng)。

小結

在實驗研究中,適當的食物與飲水限製可為行為學、代謝學、胃腸道、藥理學和生理學(xué)研究提供(gòng)關(guān)鍵的(de)數據和重要的見解。然而,在實(shí)施限製(zhì)時,必須(xū)確保動物的健(jiàn)康與福利不受影響(xiǎng)。通過科學設計、嚴格檢(jiǎn)測和倫理審(shěn)查,研究人員可以在確保實驗準確性的同時,最大程度地減少對動物的負麵(miàn)影響。

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