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 來源(yuán): 日期:2025.01.14 

齧齒類實驗動物常見的鞭毛蟲

鞭毛蟲屬於原(yuán)蟲,即具有(yǒu)獨立完成生命活(huó)動(dòng)的單細胞真核生物,在生物學分類上隸屬於肉足鞭毛門,鞭毛亞門,動(dòng)物鞭毛綱。鞭毛蟲顧名思義,鞭毛為其特征,滋養體(tǐ)階段有一根或多根鞭毛,但也有些特殊(shū)種類為阿米巴型,會(huì)存在無鞭毛形態。本(běn)篇(piān)將介紹齧(niè)齒(chǐ)類動物中常見的鞭毛蟲。

齧齒類實驗動物常見的腸道(dào)鞭毛蟲(chóng)

01毛滴蟲

毛滴蟲隸屬於毛滴蟲目(Trichomonadida),毛滴蟲科(Trichomonadidae),該科分為兩個屬,毛滴蟲屬(Trichomonas)和三毛滴蟲屬(shǔ)(Tritrichomonas)。目前已知至少有四種毛滴蟲可以感染(rǎn)齧齒類動物,包括小鼠(shǔ)三毛滴蟲(chóng)(Tritrichomonas musculis)、人五毛滴蟲(Pentatrichomonas hominis)、鼠三毛滴蟲(Trichomonas muris)和微小三(sān)毛滴蟲(Tritrichomonas minuta)。其中鼠(shǔ)三毛滴蟲是(shì)齧齒(chǐ)類實驗動物最常見的鞭毛蟲(chóng),它具有滋養體和假包囊兩種存在形式。其滋養體大(dà)小約18~24umx12~14um,呈(chéng)梨形;假包囊呈球形,直徑約8um~13um。

包囊是原蟲(chóng)在其生活階(jiē)段中,由蟲體本身形成的一層較厚的外膜,具有較強的抵抗作用;當這個(gè)外膜並非由蟲體本身形成,而是來(lái)源於宿主,則稱為假包囊。在生活期或(huò)運動期(qī),吸取外界營(yíng)養而生(shēng)長的蟲體,稱為滋養體。滋養體較脆弱,無法在轉移宿主過程中存活,通常(cháng)不具有傳染性。鼠三毛滴蟲(chóng)的假包囊是它的感染階段,假包囊對幹燥的(de)環境抵抗不佳,一般存活不超過48h。

鼠三(sān)毛滴蟲的感染途徑是動物攝入或接觸(chù)到含有假包囊的(de)糞便或墊料等,假包囊進入到體內後,由消化液等作用轉化為滋養體,滋養體在盲腸中增殖;滋養(yǎng)體進入到結(jié)腸後,由於環境幹燥(zào),再次轉化為假包(bāo)囊,隨後排出體外。有資料顯示,在盲腸中(zhōng)滋養體和(hé)假包囊比例約為(wéi)8:1,在結腸中滋養體和假包囊比例(lì)約為(wéi)1:1。因此,在動物排出的(de)糞便中,多數檢測到的都是假包囊。雖(suī)然鼠三毛滴蟲一直以來被認為是非致病性鞭毛蟲(chóng),但也(yě)有資料顯示鼠三毛滴蟲(chóng)可引起實驗動物的厭食和腹瀉。

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40× 紅色箭頭為鼠三毛(máo)滴蟲,可(kě)見明顯波動膜

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40× 紅色箭頭為毛滴蟲偽包囊,藍色箭頭為(wéi)滋養體

02賈第鞭毛蟲

賈第鞭(biān)毛蟲在生物學分類上隸屬於雙滴目(Diplomonadida),六鞭科(Hexamitidae),賈第屬(Giardia),屬於致(zhì)病性鞭毛蟲。賈第(dì)屬的形(xíng)態很相似,但具有種(zhǒng)屬特異性,因此根據宿主而分為不同的蟲種。感染齧齒類動(dòng)物的蟲種有腸(cháng)賈第鞭毛蟲(又稱十二指腸賈第鞭毛蟲或藍氏(shì)賈(jiǎ)第鞭毛蟲)(Giardia intestinalis/duodenalis/lamblia)、倉鼠賈第(dì)鞭毛蟲(G. cricetidarum)、鼠賈第鞭毛蟲(G. muris)和微小賈第(dì)鞭毛蟲(G. microti)。腸賈第鞭毛蟲根據其基因型被分(fèn)為(wéi)8個型,其中G型會感染齧齒動物。

賈第鞭毛蟲具有滋養體和包囊兩種時期,滋養體呈典型的倒置梨形,呈“落葉”式運(yùn)動;包囊呈卵圓形,長8~10um,寬7~10um。由於(yú)蟲體(tǐ)可在包囊內增殖,所以有時可在包囊內看見兩個或四個核。滋養體是其生長(zhǎng)、發育和增殖期;四核(hé)的包囊則為感染期。賈第鞭毛蟲通過攝入或接觸(chù)含包囊的糞便或飲用水等進(jìn)行傳播,包(bāo)囊進入消(xiāo)化道內,經胃(wèi)酸刺激包囊會生成兩個滋養(yǎng)體;當滋(zī)養體到(dào)達(dá)空腸時,又轉化成包囊。一般正常動物感染賈第鞭毛蟲症(zhèng)狀不明顯,有時會出現體重減輕,毛發粗糙等症狀;但可(kě)能會導致免疫缺陷動物死亡。

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40× 紅色(sè)箭頭為賈第鞭毛蟲包囊

03鼠六鞭毛蟲

鼠六鞭毛蟲(Spironucleus muris,舊稱Hexamita muris)在生物學(xué)分類(lèi)上隸屬於雙滴目(Diplomonadida),六鞭科(Hexamitidae),六鞭屬(Hexamita)。鼠六鞭(biān)毛蟲具有滋養(yǎng)體和包囊兩種時(shí)期,滋養(yǎng)體呈細長梨形且兩側對稱,約7~9umx2~3um,呈直線(xiàn)快(kuài)速運動;包囊呈(chéng)橢圓形,約4x3um,包(bāo)囊最多可(kě)含四個核。鼠六鞭毛蟲(chóng)的生活史與賈第鞭(biān)毛蟲相似,體型比賈第小很(hěn)多(duō)。

鼠六(liù)鞭毛(máo)蟲感染成年鼠和免疫功能(néng)正常鼠後一般(bān)無明顯症狀;但對於3-6周小鼠,易(yì)出現慢性腸炎、體重減(jiǎn)輕等症狀,更嚴重的會導致(zhì)小鼠死亡。小鼠和(hé)倉鼠的鼠六鞭毛蟲可以相互傳播,但(dàn)大鼠的鼠六鞭毛蟲具有種屬特異性。

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40× 紅色箭頭為鼠六包囊

04唇鞭毛蟲

唇鞭毛蟲在生物學分類上隸屬於(yú)旋滴目(mù)(Retortamonadida),旋滴科(Retortamonadidae),唇鞭毛蟲屬(Chilomastix)。該屬目前已報道(dào)約29種,形態(tài)相似(sì)。鼠唇鞭毛蟲(chóng)(Chilomastix bettencourti)寄生於齧(niè)齒動物盲腸中,具有滋(zī)養體和(hé)包囊兩個時期(qī),包囊是感(gǎn)染期。滋養體呈梨形,約(yuē)8.3~20.9umx6.6~8.4um;包(bāo)囊(náng)呈檸檬型,約15x7um。腸唇鞭毛蟲(Chilomastix intestinalis)寄生於豚鼠,也具有滋(zī)養體和包囊兩個時期。

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40× 紅色箭頭為鼠唇鞭毛蟲

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40× 紅色箭頭為唇鞭毛蟲包囊(náng)

旋滴科的另(lìng)一代表屬為旋滴蟲屬(Retortamonas),這一屬形態和唇鞭毛蟲屬很相似(sì),在豚鼠中發(fā)現過。如豚鼠(shǔ)內滴(dī)蟲(Retortamonas caviae),具(jù)有滋養體(tǐ)和(hé)包囊兩種時期,滋養體呈梨形,約(yuē)4~7umx2.4~4.3um;包囊呈檸檬狀,約4.2x3.5um。

05其他鞭毛蟲

還有一些不常見的鞭毛蟲,如小鼠中曾發現過的倉(cāng)鼠四毛(máo)滴蟲 (Tetratrichomonas microti)以及豚鼠中曾(céng)發現的脫莫室(shì)滴蟲( Oikomonas termo)、奧古旋滴蟲( Spiromonas augusta)和活動豚(tún)鼠毛滴蟲( Caviomonas mobilis)等。但目前僅有資料對這些鞭毛蟲的形態進行描述,其致(zhì)病性及防治(zhì)方麵(miàn)研(yán)究甚少。

鞭毛蟲的(de)檢測

在進行鞭毛蟲檢測時,對於(yú)一些滋養體狀(zhuàng)態的(de)鞭毛蟲,鏡檢法可容易檢出;但對於一些假包囊(náng)和包(bāo)囊狀態的鞭毛蟲(chóng),就需要檢測人員有一定的經驗積累(lèi)。根據上述部分鞭毛蟲的(de)生活史,在鏡檢時應(yīng)盡(jìn)量選擇新鮮回盲腸內容(róng)物,可(kě)通過辨認(rèn)滋養體,從而提(tí)高檢出率。

核酸檢測技術目前也常用在鞭毛蟲(chóng)的檢測中,如PCR、qPCR、巢式PCR、LAMP技術等。PCR方法可以通過擴增鞭毛蟲18S rRNA、16S rRNA、5.8s rRNA和(hé)ITS等保守基因,對鞭毛蟲達到種水平(píng)鑒定。但由(yóu)於實驗(yàn)動(dòng)物感染鞭(biān)毛蟲的多樣性,對引物要求較高。因(yīn)此,核(hé)酸檢測技術在鞭毛蟲的鑒定分類(lèi)應用上還(hái)有很大的發展(zhǎn)空間。

鞭毛蟲對動物的影響

雖然大(dà)部分鞭毛蟲均(jun1)顯示對齧齒類實驗動物無致(zhì)病性,但這些鞭毛蟲對齧(niè)齒類實驗動物的行為改變和免疫狀態改變均應當引起(qǐ)重視(shì)。目前也(yě)有越來越多的研究顯示,鞭毛蟲可以影響齧齒(chǐ)類實驗動物細胞因(yīn)子的分泌;對(duì)實(shí)驗動物部(bù)分生理生化指標的影響;引起動物腸道炎(yán)症等。

鞭毛蟲的預防和控(kòng)製

規(guī)範動物房飼養流程,對進出人(rén)員進行(háng)培訓(xùn)管理,可(kě)以一定程度(dù)上預防鞭毛蟲傳播。動物房應當建立控製蟲害(hài)管(guǎn)理程(chéng)序,野生的齧齒動物攜帶很多(duō)寄生蟲(chóng),具有(yǒu)很大的(de)潛在風險。首先一定要保證動物飲水和飼料的(de)潔淨度;選擇合適飼料,保證動(dòng)物營養,從而增加免疫力;動物飼養流程規範,避免不當操作而引起鞭毛蟲傳播;引入動物來源穩定,避免引入疫區動物而汙染屏障設施;不同等級動物分區飼(sì)養,避免交(jiāo)叉汙染;增加對設施內動物質(zhì)量監測頻(pín)率,都可以對鞭毛蟲的(de)傳播(bō)起到預防作用。

在發現陽性動物後,應(yīng)迅速隔離(lí)陽性動物(wù)並進行(háng)篩查,防(fáng)止擴散傳(chuán)播。在飲用水(shuǐ)中加入硝基咪唑類藥物,如甲硝唑和替硝(xiāo)唑,可以對鞭毛蟲起到(dào)控製作用,但並不能完全清(qīng)除;近年來有一些研究證明甲硝唑對大鼠和小鼠有致癌致突變性,替硝唑副作(zuò)用較小(xiǎo)。賈(jiǎ)第鞭(biān)毛(máo)蟲還可以選擇芬苯達唑、甲苯達(dá)唑和阿苯達唑。但若想對設施內鞭毛蟲進行完(wán)全清除,建議篩查並淘汰陽性動物。淘(táo)汰(tài)陽性動物(wù)後,應(yīng)及時清(qīng)理汙染的糞(fèn)便及墊料(liào),並進行無害化處理;對汙染的籠(lóng)具可進行高溫滅菌處理。

一般鞭(biān)毛蟲對消毒劑都比較敏感,可使用季銨鹽類(lèi)消毒劑對房間進行定期消毒處理,也可有效控製鞭毛蟲傳播。鞭毛蟲的(de)包囊和偽包囊對幹燥環境比較敏感,在(zài)幹燥環(huán)境中存活時間較短,同時該時期(qī)也是大部分鞭毛蟲的感染期。保持動物飼養環境幹燥,也可以對鞭毛(máo)蟲(chóng)傳播起到控製作用。

如需徹底清除鞭(biān)毛蟲,可以使用剖(pōu)腹產技術和胚胎移植技(jì)術達到淨化目的。

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