血生化檢測

血生化檢測是對實驗動物血液內離子、脂類、蛋白質和各種酶等物質濃度的檢測。這些檢測項目的（de）變化一般都與特定（dìng）器官的功能有關，對評（píng）估（gū）實驗動物健康狀態以及驗證實驗動物造模是否成（chéng）功等，都具有（yǒu）重要指導意義。由於血生化涉及項目較多，本號將分（fèn）兩篇對其進行介紹。

絕大多數血生化檢測都可以用血清或肝（gān）素血漿樣本檢測，兩者的檢測（cè）結果會有差異（yì），但（dàn）這種差異並無（wú）臨床意（yì）義。然（rán）而，對於需要長期監測動物，相同指標應在監測周期內（nèi）選擇相同樣本進（jìn）行檢測。樣本的保存和抗凝劑的使用均應根據不同的檢測項目進行選擇。此外，樣本采集的質量（liàng）可直接影響檢測結果。

對於大多數血生（shēng）化項目，樣本應在采集後及（jí）時檢測（cè），如（rú）不能及時檢測，3天內可4℃或冷凍（-20℃或更低溫度）保存；若保存時長超出3天，需冷凍（-20℃或更低溫度）保（bǎo）存，切忌將樣本反（fǎn）複凍融後進行檢測。但（dàn）一些生化項目（mù）低溫保存也會影響其活性，如乳酸脫氫酶和穀草轉氨酶。

尿素（sù）、鉀、鈉離子（zǐ）避免使用含（hán）銨鹽類抗凝劑進（jìn）行（háng）檢（jiǎn）測；穀丙轉氨酶、肌酸激酶和總蛋白避免使用枸櫞酸（suān）鈉抗（kàng）凝劑進行（háng）檢測。本文僅列出部分生化項的抗凝劑選（xuǎn）擇，更（gèng）多信息可參考WHO 2002年發（fā）布的（de）《實驗室檢查中抗（kàng）凝（níng）劑的使用》。

齧齒動物尤其實驗大小鼠的血生化參考範圍，目前仍沒有（yǒu）建立標（biāo）準參考。這與實驗大小鼠（shǔ）的品係眾多有關。已有文獻證（zhèng）明，不（bú）同（tóng）品係的小（xiǎo）鼠血生化會有差異。並且血生化（huà）的結果與動物的年齡和性別等因素相關。另外，由於不同機構使用的檢（jiǎn）測方（fāng）法不同，如幹式生化分析儀和濕式生化分（fèn）析儀，且使用試劑盒品牌不同、試劑盒檢（jiǎn）測原理不同等，均會（huì）導致結果不同。這些因素都導致了實驗大小鼠的血生化標準參考範圍無（wú）法建立，目前可查到的參考範圍，均應根據內部情況進行參（cān）考。

蛋白質與肝膽功能（néng）檢測

1.   總蛋白（Total protein, TP）

血液等體液中（zhōng）的蛋白質種類眾多，但目前尚無一（yī）種常規檢測技術可以（yǐ）對體液（yè）中各種類型蛋白質總量進行準確測定。因此，臨（lín）床（chuáng）對體液中總蛋白質測定通常是假設所有的體液蛋白質均（jun1）是單純蛋白質，且（qiě）各種體液蛋白與化學試劑的反應（yīng）性均一致。基於以上兩個（gè）假（jiǎ）設，目前（qián）測定總蛋白最（zuì）常用的方法有雙縮脲法和紫（zǐ）外分光光度法。血清中的總蛋白（bái）實際檢測（cè）的是除纖維蛋白原以外的成分（fèn），因此用血漿測（cè）定總蛋白較血清測定值（zhí）偏（piān）高。

總蛋白的濃（nóng）度主要（yào）反（fǎn）應（yīng）肝髒合成功能和（hé）腎髒病變造成蛋白質丟失（shī）情況，可以用來判斷（duàn）機體的（de）水合（hé）狀態，脫（tuō）水的動物總蛋白濃度會相對升高，即高蛋白血症。當動物出現慢性肝髒疾病、骨髓瘤、自身免疫性疾病、慢性炎（yán）症和感染（rǎn）等，會導致TP和球蛋白同（tóng）時升高。

過度水合動物總蛋白濃度會相對降低（dī），即低蛋白血症，此時動物（wù）可（kě）能會出現（xiàn）浮腫、胸腔或腹腔積液。TP和（hé）白蛋白同時（shí）降低常見於肝功能受損導致蛋（dàn）白質合成減少、營養不（bú）良、蛋（dàn）白丟失過（guò）多、消耗增加等病理性因素。

2.   白蛋白（bái）（Albumin, ALB）

ALB由肝實質   細胞合成分泌，是血漿中含量最多的蛋白（bái）質，大部分動物的白蛋白占血漿蛋白的35%~50%。ALB是動物機體內重要（yào）的營養蛋白，參與維持內環境穩定，也是血漿中多種物質的主要轉運蛋白。當出現炎性疾病、漿（jiāng）細胞瘤、淋巴（bā）瘤、腎小球腎炎、營養不良、過度水合等，均會導致齧齒動物出現血清白蛋白的降低；ALB升（shēng）高則多見於脫水動物。

3.   球蛋白（bái）（Globulin，GLB）

球蛋白可以分為α球蛋（dàn）白、β球蛋白和γ球（qiú）蛋白，大多數（shù）α球蛋白和β球蛋白由肝髒合成，γ球蛋白由（yóu）漿細胞合成。α球（qiú）蛋白（bái）中比（bǐ）較重要的兩種蛋白質分別是高密度脂蛋白和極低密度脂蛋白；β球蛋白包括補體（C3、C4）、轉鐵（tiě）蛋白和鐵蛋白；γ球（qiú）蛋白（即免疫球蛋白）包（bāo）括IgG、IgD、IgE、IgA和IgM。

球蛋白的濃度一般通過總蛋白與白（bái）蛋白的差值來進行計算。球蛋白減少主要由於合成減少，如使用免疫抑製劑；球蛋白的增加多見於γ球蛋白，常見原因有慢性肝髒疾（jí）病、免疫性疾病、骨髓瘤等。

4.   白蛋（dàn）白/球蛋白（A/G）

白球比應結合蛋白質指標進行分析，不同種類（lèi）、品係、年齡、性別動（dòng）物的白球比（bǐ）都有差異（yì），很多（duō）病理狀態會改變白球（qiú）比。當白蛋白和球蛋白（bái）均變化時，如出血（xuè）導致白蛋白和（hé）球蛋白丟失（shī）、脫水導致球蛋白和（hé）白蛋白增加時，A/G比值將變化（huà）不大或保持在正常範圍內；當其中一個數值發生變化且占主導時，那麽A/G比值將發生（shēng）異常，如免疫球蛋白的產生導（dǎo）致A/G比值降（jiàng）低（dī）、免疫球（qiú）蛋白缺乏導致A/G比值增高。在（zài）臨床上，ALB、TP、GLB和A/G比值應結合一起進行分析。

5.   穀丙轉氨酶（Alanine aminotransferase, ALT）

臨床上廣泛用（yòng）來作為肝細胞損傷指（zhǐ）標，也是中間代謝的關鍵酶。ALT主要存在於肝髒，但也（yě）廣泛存在於腎髒、心肌、骨骼肌、胰腺等組織中，這些（xiē）組織出現損傷或壞死，也會導致血清ALT水平升高。由於ALT主要存在於細（xì）胞（bāo）質，釋放比較容易，因此ALT升高（gāo）可出現在（zài）組織損（sǔn）傷早期。血液中ALT的水平與肝損傷的嚴重程度不呈現相關性，ALT通常會在肝損傷12h內升高，並在24~48h內達到峰值，除非存在慢性肝損傷，一般情況下（xià）血清ALT水平會在幾周（zhōu）內恢複正常。比較（jiào）特殊的是，豚鼠中ALT活性較低，因此ALT不適合（hé）用來作為判斷其肝損傷的標誌物。

目前已發現在人類、大小鼠和狗中，ALT具有兩種（zhǒng）亞型，分別為ALT1和ALT2，其中ALT1主要在腎髒、肝髒（zāng）、脂肪和心組織中表達；而ALT2主要在肌肉和脂肪中表達。在小鼠中，ALT2被認為是脂肪（fáng）變性的標誌物。ALT亞型的（de）區分可以更精準反應器官損傷情況，但目前ALT分型的檢測尚未廣泛應用（yòng）在（zài）實驗動物檢測中。

6.   穀草轉氨酶（Aspartate aminotransferase, AST）

AST主要存在於肝細胞內，在正常大鼠血清中，細胞質中的AST約占總AST活性82%，線粒體膜上的AST約占總AST活性18%。此外，AST也存在於其他組（zǔ）織中，如心髒、骨骼肌、腎髒、胰腺（xiàn）等，這（zhè）些組織（zhī）損傷（shāng）或壞死時，血清中AST也會升高。AST水（shuǐ）平（píng）升高表示非特異性肝髒損傷，齧齒動物在應激狀態或肌內注射也可能導致AST升高，AST升高應先檢查血清或血漿樣本是否溶血，結合肌酸激酶水平，排除是否為肌（jī）肉損傷導致AST升高，上述原因（yīn）排（pái）除後，方可考慮為肝損傷導致（zhì）AST升高。

7.   堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase, ALP）

ALP是一組在酸性條件下水解磷酸（suān）單酯類化合（hé）物的酶，在許多組織中存在其同工酶，尤（yóu）其是肝膽係統、骨骼內的（de）成骨細（xì）胞、軟骨內的成軟骨（gǔ）細胞、腸道細胞。ALP水（shuǐ）平與齧齒類動物的年齡及性別具有相關性，處於生長期的未成年動（dòng）物ALP水平（píng）較高，隨著動物年齡的增長，ALP水（shuǐ）平明顯降低；且大多數雌性動物ALP水平低於雄性動物。而ALP的病理性升高則常見於（yú）發生肝膽疾病、骨（gǔ）骼疾病、惡性腫瘤時的動物。

8.   γ-穀氨酰轉移酶（Gamma-glutamyltransferase, GGT）

GGT存（cún）在於許多組織中，包（bāo）括腎髒、胰腺、腸道和肌細胞。GGT升高多見於動物發生（shēng）肝髒疾病、膽管阻塞以及急性胰腺炎等。需要注意的是，GGT在腎髒中濃度最高，但發（fā）生腎髒疾病時，GGT的增加並不明顯，這（zhè）是因為GGT會從受損的管狀上皮細胞中釋放到（dào）尿液（yè）中，而不是血液中。

9.   膽（dǎn）紅素（Bilirubin, Bil）

膽紅素是一種不可溶性分子，由脾髒內巨噬細胞降解血紅（hóng）蛋白產生，是各（gè）種含血紅素蛋白中的（de）血色素在一些係列酶作用下的降解產物，與脂類的消化吸收及黃（huáng）疸形成（chéng）具有重要關係。膽紅素在（zài）光照下分解，因此，樣本應避光保存以保證結果（guǒ）準確性。當動物出現膽汁（zhī）運輸障礙或腸（cháng）道（dào）吸收不良時，會導致膽紅素降低；當動（dòng）物出現溶血性疾病導致紅細胞破壞或內（nèi）出血（xuè）時，可使膽紅（hóng）素含量增高。

10.  膽汁（zhī）酸（Bile acids, TBA）

齧齒動物的（de）膽汁酸代謝與人類有所不同，大小鼠的膽汁酸以膽固醇為（wéi）原料在（zài）肝細胞中合成，由肝源性分子組成（chéng），並主要與牛磺酸結合。膽汁酸可以促進脂（zhī）類的消化吸收、調（diào）節膽固醇的代謝以及促進膽汁分泌。當動物出現肝功能受損、膽道阻塞等疾病時，均會導致膽汁酸水平增加。

腎髒功能檢測

1. 尿素（Urea）

尿素是哺乳動物（wù）蛋白（bái）質（zhì）代謝的（de）主要終末產物，可（kě）自由濾過腎小球，當腎實（shí）質受損時，腎小球濾過（guò）率（lǜ）下降（jiàng），血尿（niào）素濃度會升高，因此可以通過測定尿素水平來評估腎功能。需要注意（yì）的是，產尿酶菌（如金黃色葡萄球菌/變形杆（gǎn）菌屬/克雷伯菌屬）汙染的血（xuè）液樣本可（kě）導致尿素分解，導（dǎo）致尿素水平下降（jiàng），為避免（miǎn）這（zhè）種情況，樣本（běn）采集後應及時進行檢（jiǎn）測，如不能及時檢測，應將（jiāng）樣（yàng）本放置在冰箱（xiāng）冷藏中保存。另外不同性別及年齡差異，也會影響尿素水（shuǐ）平，隨著動物（wù）年齡增長，尿素水平會呈現下降趨勢。尿素的增（zēng）加多見於高蛋白飲（yǐn）食、脫水以及腎功能衰竭等。

2. 肌酐（Ceatinine, Crea）

血肌酐經腎小球濾過進入原尿，並且不被腎小管重（chóng）新吸收，機體內肌（jī）酐應保持恒定（dìng），因此（cǐ）測定血肌酐水平可以用來評估腎功能。但是和尿素一樣，肌酐不是腎（shèn）功能的準確指標，當腎功能損傷近75%時，方可引起血肌酐水平升高。肌酐降低則多見於動物營養不良、貧血等。

3. 尿酸（Uric acid, UA）

尿酸是嘌呤（lìng）堿基代謝產物，主要存（cún）在於肝髒中，小部分可經肝髒（zāng）隨膽汁排泄（xiè）。尿酸可自由濾過腎小球，也可腎小管排泄。因此，排除外源性尿酸幹擾，血尿酸可反映腎小球濾過（guò）功能（néng）和腎小管重吸收功能。當機體出現急（jí）性或慢性腎炎、多發性骨髓瘤等均會導致UA升高；肝髒壞死、肝功能衰竭（jié）等病理原因則會導致UA降低。