簡介

盡（jìn）管存在解剖和生理上的差異，小鼠在（zài）研究人類肺部疾病，包括急性肺損傷（ALI）和肺纖維（wéi）化方麵（miàn）仍具有極高的（de）價值。治療方法是諸（zhū）多肺部疾病研（yán）究的核心，其（qí）中口咽吸入法（OPA）已被廣泛用，但其缺點是（shì）部分藥劑可能被吞入胃腸道，從而導致給藥劑量的不準確；另一種是經氣管給藥，這涉及到在深度麻醉狀態（tài）下切開氣管直接將藥（yào）物注入到呼吸道（dào），然而，這種操作不僅因其侵入性和造成呼吸道損傷而不可取，還（hái）存在耗時（shí）過長，且操作者需要大量的訓練等問題。

1999年，Brown等人發表研究論文描述了一種小鼠肺部直接插管的方法（fǎ），後續也有其他幾篇（piān）論文描述（shù）了不同的小鼠肺部插管方法，但這種插管的主要問（wèn）題是：當插管（guǎn）導（dǎo）管接近氣管並準備插入時（shí），導管本身（shēn）會阻擋光線，從而無法看清（qīng）需要插入的位置。

本文展示了如何簡（jiǎn）單、低成本地消除這個可視化問題，從而確保在相對少的（de）培訓或經驗下成功進行插（chā）管（guǎn）。

方法

準備（bèi）：

1、導管。對（duì）於20-35 g小鼠的插管，我們使用1或1.5英寸長，20 g IV導管(BD Insylte, Sparks, MD或Jelco Optiva, Carlsbad, CA)。可以為每隻小（xiǎo）鼠使用新的無菌導管，但導管也可以在消毒後用70%乙醇浸泡過夜重複使用。盡管小鼠的咽（yān）部和氣管不是無菌的，但應遵循適當的清潔程序（xù），包括使用無菌手套（tào）和器械。

2、光纖電纜。我們使用約70厘米長、0.5毫米粗的Edmund Optics光纜，但長度不是決定（dìng）性（xìng）的因素（sù）。重要的是要確保纖維（wéi）的邊緣是平滑的，因為在（zài）用剃刀切割電纜後，邊緣相對較銳利，很容易刺穿氣管壁。然而隻需將光纖（xiān）端部放在1000粒度的砂紙上，就可以非常容易（yì）地打磨平（píng）這個邊緣。另一端插入橡膠塞中。最簡便的方法是先用18號針通過橡膠塞，插入光纖通過針孔，然後撤出針。橡（xiàng）膠塞連接150瓦鹵素（sù）光源。重要的是要確保使用矽膠橡膠塞（sāi）(或其他耐熱材料)，因為普通橡膠或軟木在（zài）靠（kào）近熱（rè）光源時可能會燃燒。

插管（guǎn）：

1、參見圖1和2。通過一段短矽橡膠管(ID≈0.8 mm×OD 4mm, Cole-Palmer, EW-96410-13)插入光纖（xiān）電纜。將這個橡膠管係（xì）緊，同時仍然允（yǔn）許（xǔ）調整光纖電纜。將矽膠（jiāo）管緊密地插入套管（guǎn）的魯爾端，固定光纖電纜在套管內的位置（zhì）。調整光纖電纜的位置，使其在套管尖端前方約4毫米處穿過套管。

圖1.如圖所示，光纜插入矽橡膠塞（sāi）中，與其（qí）相對的另（lìng）一端緊綁著一小段矽橡膠管。

圖2.圖片（piàn）展示了橡膠塞與（yǔ）光源（yuán）的連接，光（guāng）纖的另一端（duān）穿過插管導管。左側還展示了一個（gè）簡單（dān）的支架，用於在插管過程中固定（dìng）小鼠。

2、將麻醉後的小鼠放（fàng）置在垂（chuí）直支架上，由其上切牙懸掛(圖3)。大多數研究者發現，當小鼠的腹側麵向自己時，視覺（jiào）效果最佳（jiā）。非（fēi）常輕柔地拔出舌頭，用（yòng）拇指和食指握住。中指放在頸部和塑料支架之間。利用食指和拇指對舌頭的（de）牽引開啟口腔，並（bìng）用頸部後方的中指調（diào）整頭部的角度，使插管路徑伸直，如（rú）圖（tú）3所示。

圖3.兩個視角展示（shì）了準（zhǔn）備插管的小鼠位置

3、使用光纖電纜作（zuò）為光源和導入器，推動它通過可視化聲帶。如果看不到聲帶，可以通過中指作為支點，輕輕用（yòng）力拉舌頭。插（chā）入後，將套管再向前推進約5 mm。然（rán）後，小心不要移（yí）動套管，拔出光纖電纜。將小鼠平躺下來，用膠帶固定導管，並用橡皮泥(塑型黏土)支撐導管接頭（tóu），如圖4所示。

圖4。此圖（tú）展示了一隻準備（bèi）通氣的已插管小鼠。圍繞嘴部的膠帶有助於（yú）防止導管移動。一小塊橡皮（pí）泥(建模黏土)提供了一（yī）個便利（lì）的支撐點，用於固定導管（guǎn）接頭與呼吸機的連接。

4、步（bù）驟3中的操作不容易演（yǎn）示或教學，因（yīn）為這是一個單獨的操（cāo）作。然而，通過對舌頭的牽引力和頭部後麵的支撐的（de）微（wēi）妙調整，幾乎所有嚐試這種方法的人（rén）都（dōu）會（huì）很快找到正（zhèng）確的方式來調整小鼠的位置，使（shǐ）聲帶可視化。

總結

本文（wén）描述的方法有幾個優點。首先（xiān），裝置（zhì）簡單且價格低廉。製作裝置不需要任何特殊工具或昂貴的設備（bèi）。在實踐中，對（duì）於從未嚐試過插管（guǎn）的研究員、學生和技術（shù）人（rén）員來說更容易掌握。

在進行插管時，有幾個實際問題需要提及。在最初打開小鼠口腔時（shí），盡量輕柔拉舌頭非常重要。如果使用無保護鉗，很容易損傷舌頭，這可能導（dǎo）致小鼠死亡。在首次學習如何插管時，最重要的（de）是（shì）使用頸部後方的手指來調整頭部角度，以使氣管開口的可視化。如果操作正確，對舌頭進行足夠的牽拉，很容易看到聲帶。最初的可視化步驟通常需要最多的時間，因為一旦看到氣管開口，插入纖維電纜和靜脈導管就相對（duì）簡（jiǎn）單了。

總之，本文（wén）描述（shù）的插管方法製作成本低，使用（yòng）簡單，可以令大多數研究（jiū）人員和實驗室技（jì）術人（rén）員在相對較少的經驗下快速掌握小鼠插管技術。